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COS-7細(xì)胞/ SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞培養(yǎng)步驟

發(fā)布時間：2019-11-11瀏覽：1291次

COS-7細(xì)胞/ COS-7 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱：COS-7細(xì)胞

中文名稱：SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-7

規(guī)格：T25

形態(tài)特征：此細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV40病毒突變體得到；編碼表達(dá)野生型T抗原，所以該細(xì)胞適合作為需要SV40T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，允許SV40病毒的溶解性生長，支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復(fù)制，支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復(fù)制。因含有SV40病毒的DNA序列，該細(xì)胞需要在2級生物安全柜中操作。

生長狀態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

特征特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS（推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：1：2傳代

凍存條件：HAKATA ® 無血清細(xì)胞凍存液貨號：H-W-100 規(guī)格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權(quán)限：A類

參考文獻(xiàn)：

供應(yīng)商：上海慧穎生物科技有限公司

復(fù)蘇周期：10個工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司，擁有獨(dú)立細(xì)胞房（可隨時約定參觀），供應(yīng)胎牛血清，無血清細(xì)胞凍存液，無血清培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，*培養(yǎng)基，STR鑒定細(xì)胞，感受態(tài)細(xì)胞等，專業(yè)，專注，性價比高，是您Shou選之家。

熱賣細(xì)胞：

貨號簡稱中文名稱培養(yǎng)條件特性形態(tài)

H001 HeLa 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H002 143B 人骨肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H003 293T 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H004 A2780 人卵巢癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H005 A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H006 A673 人尤因肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁多邊形

H007 AGS 人胃腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H008 BGC823 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H009 C33A 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H010 CACO2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 DMEM+20% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H011 COLO205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 半懸浮上皮細(xì)胞樣

H012 DU145 人前列腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H013 ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 McCoy's +10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H014 H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H015 H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H016 HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 DMEM+15% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H017 HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's +10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H018 HEK293 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H019 HEPG2 人肝癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H020 HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化) DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H021 HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's +10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H022 HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ECM 貼壁上皮細(xì)胞樣

H023 KYSE150 人食道癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H024 L02(HL7702)(QSG-7701) 人正常肝細(xì)胞 RPMI-1640+20% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H025 LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H026 MCF-10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞 DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清貼壁上皮細(xì)胞樣

H027 MCF7 人乳腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素貼壁上皮細(xì)胞樣

H028 LX-2 人肝星狀細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H029 MDA-MB-468 人乳腺癌細(xì)胞 L-15+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H030 MIA Paca2 人胰腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣少量圓形懸浮

H031 NCI-H1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H032 PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H033 RBE 人肝膽管癌細(xì)胞 DMEM+10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H034 SAOS-2 人成骨肉瘤細(xì)胞 McCoy's +15%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H035 SiHa 人子宮頸鱗癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H036 NB 4 急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮圓形

H037 SPC-A-1 人肺腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H038 SW480 人結(jié)腸癌細(xì)胞 L-15+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H039 U-87MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H040 ZR-75-1 人乳腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H041 SW1116 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 L-15+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H042 293A 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H043 SGC-7901 人胃腺癌細(xì)胞 RPMI-1640 +10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H044 Ishikawa 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H045 Eca-109 人食管癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H046 RD-ES 人尤文氏肉瘤 RPMI-1640+15% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H047 NCI-H1437 人肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H048 HOS 人骨肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H049 Hela S3 人宮頸癌細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H050 ECC1 人宮頸內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H051 SUP-B15 人Ph+急淋白血病細(xì)胞系 IMDM+20% FBS 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H052 TF-1 人血液白血病細(xì)胞 RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H053 NCI-H446 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H054 GES-1 人胃正常黏膜上皮細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H055 IOSE80 人卵巢正常上皮細(xì)胞株 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H056 GIST882 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H057 KGN 人卵巢顆粒細(xì)胞癌 DMEM/F12(1:1)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H058 U937 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 RPMI-1640 +10% FBS 懸浮單核細(xì)胞樣

H059 SV-HUC-1 人膀胱上皮永生化細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H060 tpc-1 人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H061 hela-luci Luciferase穩(wěn)定表達(dá)Hela細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H062 colo320 人結(jié)腸癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 半懸浮圓形

H063 bxpc-3 人胰腺腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H064 raji 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H065 5637 人膀胱癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H066 chang-liver 人肝細(xì)胞(已被hela污染） DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H067 a549-gfp gfp標(biāo)記的A549細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H068 hs578.t 人乳腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素貼壁上皮細(xì)胞樣

H069 T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 McCoy's +15%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H070 K562 人慢性髓系白血病細(xì)胞 IMDM+10% FBS 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H071 EH-GB1 人膽囊癌細(xì)胞（表達(dá)GFP和RED2） DMEM+15% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H072 skov-3 人卵巢腺癌細(xì)胞 McCoy's +15%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H073 ECV304 人膀胱癌細(xì)胞（T24衍生物） M199+20%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H074 nci-n87 人胃癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H075 B-CPAP 人甲狀腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H076 NCI-H1975 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H077 HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 DMEM/F12(1:1)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H078 J82 人膀胱癌細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H079 A431 人皮膚鱗癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H080 MG63 人骨肉瘤細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H081 SW48 人結(jié)腸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H082 ME180 人宮頸表皮樣癌 McCoy's +10%FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H083 hepaRG-GFP Gfp標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H084 BEAS-2B 人正常肺上皮細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H085 THP-1 ATCC：TIB-202 人髓系白血病單核細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮單核細(xì)胞樣

H086 PC9 人肺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H087 Fadu 人咽鱗癌細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H088 Huh7 人肝癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H089 Hcc9810 人肝癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H090 Jurkat cloneE6-1 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H091 KBM-7 人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞 IMDM+10% FBS 懸浮圓形

H092 GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H093 JEKO-1 人套細(xì)胞淋巴癌細(xì)胞 RPMI-1640+20% FBS 懸浮圓形

H094 CAL27 人口腔鱗癌 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H095 DB 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮淋巴母細(xì)胞樣

H096 hne1-lmp1 轉(zhuǎn)入LMP1基因人鼻咽癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H097 nci-h226 人肺鱗癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

H098 hepg2.2.15 人肝癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁上皮細(xì)胞樣

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