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ARPE-19，人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞消化要有個(gè)度

發(fā)布時(shí)間：2018-06-06瀏覽：1668次

ARPE-19，人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞消化要有個(gè)度

產(chǎn)品代號(hào)：ARPE-19

中文名稱(chēng)：人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞

種屬：人

是否鑒定：已鑒定

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨

慧穎生物提供2000種類(lèi)細(xì)胞株細(xì)胞系，400多株已鑒定細(xì)胞，涉及種屬：人，大鼠，小鼠，兔子，魚(yú)，牛，倉(cāng)鼠等，我們提供好的產(chǎn)品，好的服務(wù)，好的技術(shù)，復(fù)蘇周期短，*，細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，有光澤，無(wú)支原體。

ARPE-19，人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞消化要有個(gè)度

細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就細(xì)胞消化而言，多做、善于總結(jié)，就可以把細(xì)胞養(yǎng)的越來(lái)越好

絕大部分細(xì)胞消化只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可：

吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞（絕大部分1min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后37度消化。

什么算是消化好了呢？

不需要把細(xì)胞全部消化成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了。

一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。

細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，你可以嘗試，準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。

一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，即使是成片的（比如Calu-3細(xì)胞），吹打不超過(guò)20次（一般10次即可），成小規(guī)模聚集（10個(gè)細(xì)胞左右）是正常的，不要再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。

比較難消化的細(xì)胞：

潤(rùn)洗方法5min還不能消化，以結(jié)腸癌細(xì)胞為例，比如HCT15、LS411和KM12細(xì)胞，胰酶消化，一般10 cm 培養(yǎng)皿，一次zui多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)5min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，用胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。

常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，受消化影響不是很大：

如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話（難消化細(xì)胞例外）。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求*。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液（不是EDTA液）即可。這些鹽溶液通過(guò)影響細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白。

EDTA的作用：

許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，胰酶切割細(xì)胞外基質(zhì)的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca離子，作用于整聯(lián)蛋白的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間（如果10min還消化不*的話），而應(yīng)該想其它辦法。

PBS洗滌：

消化之前用PBS洗滌，是常見(jiàn)的操作，因?yàn)檠逯泻幸种埔让傅牡鞍住?duì)于一些難消化細(xì)胞，可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制胰酶的活性。但對(duì)于絕大部分細(xì)胞用胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化，不需要配制不含Ca，Mg離子的溶液。

細(xì)胞代號(hào) 細(xì)胞名稱(chēng) 種屬鑒定結(jié)果

ARPE-19，人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞消化要有個(gè)度

編號(hào) 中文名稱(chēng) 是否鑒定

5637 人膀胱癌細(xì)胞人 √

7703 人肝癌細(xì)胞人 √

143B 人骨肉瘤細(xì)胞人 √

22RV1 人前列腺癌細(xì)胞人 √

293FT 人胚腎細(xì)胞人 √

293T 人胚腎細(xì)胞人 √

435S 人乳腺癌細(xì)胞/人黑素瘤細(xì)胞人 √

453 人乳腺癌細(xì)胞人 √

6T-CEM 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

769-P 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞人 √

786-O 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞人 √

95-D 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞人 √

97H 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞人 √

A172 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人 √

A2058 人黑色素瘤細(xì)胞人 √

A2780 人卵巢癌細(xì)胞人 √

A375 人黑色素瘤細(xì)胞株人 √

A431 人表皮癌細(xì)胞人 √

A498 人腎癌細(xì)胞人 √

A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì) 人 √

A-673 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞人 √

ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞人 √

AGS 人胃腺癌細(xì)胞人 √

AN3CA 人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細(xì)胞人 √

ARH-77 人漿細(xì)胞白血病人 √

ARO 沒(méi)有，找不到信息人 √

ARPE-19 人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞人 √

B-CPAP 人甲狀腺癌細(xì)胞人 √

BEAS-2b 人正常肺上皮細(xì)胞人 √

BEWO 人絨毛膜腫瘤細(xì)胞人 √

BGC-823 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) 人 √

BT-474 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞人 √

BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞人 √

BXPC-3 人原位胰腺腺癌細(xì)胞人 √

C-33 A 人子宮頸癌細(xì)胞人 √

C643 人甲狀腺癌細(xì)胞人 √

C8166 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

Ca Ski 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞人 √

Caco2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人 √

CAKI-1 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞人 √

cal-27 人舌鱗癌細(xì)胞人 √

CALU-1 人肺癌細(xì)胞人 √

CALU-3 人肺腺癌細(xì)胞(胸水) 人 √

CCD-1095SK 人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞人 √

CCRF-CEM 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞人 √

CEM/C1 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

CFPAC-1 人胰腺癌細(xì)胞人 √

CNE1 人鼻咽癌細(xì)胞人 √

CNE2 人鼻咽癌細(xì)胞人 √

COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞人 √

COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人 √

CW-2 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞人 √

DAOY Daoy細(xì)胞，具體不清楚人 √

DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞人 √

DETROIT 562 人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞人 √

DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞人 √

DU 145 人前列腺癌細(xì)胞人 √

EA.HY926 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞人 √

ECV304 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞人 √

ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞人 √

FADU 人咽鱗癌細(xì)胞人 √

FTC-133 人濾泡性甲狀腺癌細(xì)胞人 √

GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞人 √

GCIY 人 √

H1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H1395 人肺腺癌細(xì)胞人 √

H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H1703 人肺鱗癌細(xì)胞人 √

H1755 人肺癌細(xì)胞人 √

H1944 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H1975 人肺腺癌細(xì)胞人 √

H2170 人肺鱗癌細(xì)胞人 √

H226 人肺鱗癌細(xì)胞人 √

H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) 人 √

H358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H520 人肺鱗癌細(xì)胞人 √

H596 人肺腺鱗癌細(xì)胞人 √

H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

H716 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人 √

H838 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

Hacat 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞人 √

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞人 √

HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞人 √

HCC1937 人乳腺癌細(xì)胞人 √

HCC827 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人 √

HCCC-9810 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞人 √

HCCLM3 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞人 √

HCT-116 人結(jié)腸癌細(xì)胞人 √

HCT-8 人回盲腸癌細(xì)胞人 √

HEC-1-A 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞人 √

HEC-1-B 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞人 √

HEK-293 人胚腎細(xì)胞人 √

HEL 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

HELA229 人宮頸癌復(fù)蘇細(xì)胞人 √

Hela-J 人 √

Hep G2 人肝癌細(xì)胞人 √

HEP-2 人喉表皮樣癌細(xì)胞人 √

HEP3B 人肝癌細(xì)胞人 √

HEY 人卵巢癌細(xì)胞人 √

HFF 人包皮成纖維細(xì)胞人 √

HFL1 人胚肺成纖維細(xì)胞人 √

HFOB1.19 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞人 √

HGC-27 人胃癌細(xì)胞(未分化) 人 √

HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞人 √

HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

HMEC-1 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞人 √

HO-8910 人卵巢癌細(xì)胞人 √

HPN1 人 √

HS683 細(xì)胞人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞人 √

Hs888Lu 人肺成纖維細(xì)胞人 √

HT-1080 人纖維肉瘤細(xì)胞人 √

HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞人 √

HT-3 人 √

HTR8 人滋養(yǎng)細(xì)胞人 √

HUCCT1 膽管上皮癌細(xì)胞人 √

HuH-6 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞人 √

HUH-7 人肝癌細(xì)胞人 √

HUT78 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞人 √

HUVEC-C 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞人 √

ISK 人 √

JAR 人 √

JEG-3 人 √

JEKO-1 人 √

Jurkat，Clone E6-1 人 √

K-562 人 √

KATO III 人 √

KLE 人 √

KTC-1 人 √

KU812 人 √

KYSE-150 人 √

LI-7 人 √

LNcap clone FGC 人 √

L-O2 人 √

LOVO 人 √

LS 174T 人 √

MCF10A 人 √

MCF-7 人 √

MDA-MB-231 人 √

MDA-MB-231(DMEM) 人 √

MDA-MB-231(L-15) 人 √

MDA-MB-436 人 √

MDA-MB-468 人 √

MG-63 人 √

MGC-803 人 √

MIA PaCa-2 人 √

MM.1S 人 √

MNNG/HOS Cl #5 人 √

MRC-5 人 √

MV4-11 人 √

N87 人 √

NCI-H1299 人 √

NCI-H1563 人 √

NCI-H2452 人 √

NCI-H647 人 √

NK-92 人 √

NTHY-ORI-31 人 √

OCM1A 人 √

OS-RC-2 人 √

OVCAR-3 人 √

PANC-1 人 √

PC-3 人 √

PC-3M 人 √

PC-9 人 √

PLC/PRF/5 人 √

Raji 人 √

RBE 人 √

RD 人 √

RKO 人 √

RL95-2 人 √

RT4 人 √

RWPE-1 人 √

SAOS-2 人 √

SH-SY5Y 人 √

SiHa 人 √

SJCRH30 人 √

SK-BR-3 人 √

SK-HEP-1 人 √

SK-MES-1 人 √

SK-N-BE(2) 人 √

SK-NEP-1 人 √

SK-N-SH 人 √

SK-OV-3 人 √

SPC-A-1 人 √

SU-DHL-6 人 √

SV-HUC-1 人 √

SW 1990 人 √

SW1353 √

SW480 人 √

SW579 人 √

SW620 人 √

SW-620 人 √

SW839 人 √

SW982 人 √

T/G HA-VSMC 人 √

T-24 人 √

T47D 人 √

T82 人 √

T84 人 √

TCA-8113 人 √

TE 353.Sk 人 √

TE-1 人 √

THP-1 人 √

TMK1 人 √

TPC-1 人 √

TT 人 √

TTA1 人 √

U-118MG 人 √

U-2 OS 人 √

U251 人 √

U87 人 √

U-87MG 人 √

U-937 人 √

UM-UC-3 人 √

VCAP 人 √

WERI-RB-1 人 √

WI-38 人 √

WISH 人 √

WPMY-1 √

ZR-75-1 人 √

ZR-75-30 人 √

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