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血清10099-141

發(fā)布時(shí)間:2017-05-03瀏覽:2728次

血清10099-141 2017年這個(gè)夏天如何選擇高品質(zhì),放心使用的血清?慧穎生物與您相伴,在實(shí)驗(yàn)過程中助您一臂之力。

上海慧穎生物是一件專注細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)菌,真菌培養(yǎng)的一家公司,胎牛血清,無血清培養(yǎng)基,*培養(yǎng)基,不*培養(yǎng)基,添加因子,細(xì)胞株細(xì)胞系,ATCC原代細(xì)胞代購,ELISA試劑盒,動(dòng)物疫病診斷試劑盒,農(nóng)殘?jiān)噭┖校贵w,SIGMA現(xiàn)貨產(chǎn)品,折扣好,到貨快速!

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胎牛血清FBS (fetal bovine serum):心臟穿刺的方法采血。剖腹產(chǎn)胎牛,未接觸外界,血清中的抗體補(bǔ)體等對細(xì)胞生長的有害成分zui少。

新生牛血清:出生24小時(shí)內(nèi)

小牛血清CS(calf serum):出生10-14天

馬血清HS(horse serum)

常用的血清廠家:GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

常用貨號:10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

血清的溶解與保存

1、如果不用,先放置-80 ℃保存。

2、如果要用,可于4 ℃冰箱放置過夜,再在室溫溶解。

3、溶解好的血清應(yīng)立即分裝,-80 ℃保存。

4、保存于-80 ℃的血清解凍時(shí)應(yīng)先與4 ℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。

細(xì)胞傳代方法

根據(jù)細(xì)胞生長的恃點(diǎn),傳代方法有3種:

1.懸浮生長細(xì)胞傳代

   離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。

   直接傳代法:懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁時(shí),將上清培養(yǎng)液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。

2.半懸浮生長細(xì)胞傳代(雜交瘤)

   此類細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹

打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來,進(jìn)行傳代。

3.貼壁生長細(xì)胞傳代

   采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。

細(xì)胞冷凍保存

  1. 細(xì)胞應(yīng)生長良好,處于對數(shù)生長期,密度為80%左右。
    2.注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。 DMSO質(zhì)量要好,應(yīng)無菌且無色。
    3.  冷凍保存之細(xì)胞濃度:一般成纖維細(xì)胞1~3 x 106 cells/ml,懸浮細(xì)胞 5~10 x 106cells/ml,上皮細(xì)胞 2~5 x 106 。

4.凍存液的配方是: 60%無血清培養(yǎng)液 30%血清 10% DMSO

 

  1. 冷凍方法:  4℃ 30-60 分鐘---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮長期儲(chǔ)存。

細(xì)胞生長減慢

提高血清濃度為15-20%;

提高接種密度;

細(xì)胞的離散度;

添加細(xì)胞生長因子;

細(xì)胞不貼壁

胰蛋白酶消化過度;

支原體污染;

培養(yǎng)液中無貼壁因子

細(xì)胞傳代過程中出現(xiàn)碎片、顆粒、小黑點(diǎn)的原因

排除細(xì)胞污染后主要有以下幾種可能:

細(xì)胞長老了,傳代時(shí)細(xì)胞已100%滿度,細(xì)胞衰老;

消化時(shí)不*,吹打過度;

血清溶解時(shí)直接從-80℃放到37 ℃或室溫;

 

以上資料有上海慧穎生物市場部 王麗 編輯整理

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